期刊简介

               《现代肿瘤医学》(ISSN1672-4992,CN61-1415/R,月刊)是国家科技部、新闻出版署批准国内外公开发行的国家级肿瘤专业学术期刊,中国抗癌协会系列期刊。本刊系科技部中国科技论文统计源期刊、中国科技核心期刊、《中国学术期刊综合评价数据库》统计源期刊;美国《化学文摘》、《中国科学引文数据库》、《中国期刊网》、《中国学术期刊(光盘版)全文数据库》、《中国核心期刊(遴选)数据库》、《中国生物医学文献数据库》收录期刊;《万方数据-数字化期刊群》全文上网期刊;《CAJ-CD规范》执行优秀期刊。刊物主要介绍当前肿瘤学领域的最新成果及国内外肿瘤诊疗技术的新进展,新动向;刊登肿瘤基础研究,临床诊断、治疗方面的成果以及有创新性,科学性的新方法、新发明、新经验,努力为肿瘤学术交流及学科发展服务。主要栏目有专题专稿、论著、基础研究、临床报道、综述、流行病学、短篇报道、经验交流、中西医结合、护理园地等。                

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  • 杂志名称:现代肿瘤医学杂志
  • 主管单位:陕西省科学技术协会
  • 主办单位:中国抗癌协会 陕西省抗癌协会 陕西省肿瘤防治研究所 陕西省医学会
  • 国际刊号:1672-4992
  • 国内刊号:61-1415/R
  • 出版周期:半月刊
期刊荣誉:中国科技论文统计源期刊期刊收录:国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 知网收录(中), 维普收录(中), 上海图书馆馆藏
现代肿瘤医学杂志2006年第02期

大容量人乳腺癌单链抗体库的构建与初步鉴定

吕勇刚;窦科峰;吴昱彤;赵爱志;陶开山;韩月恒;杨雁灵;刘杰;陈刚;药立波

关键词:噬菌体抗体库, 单链抗体, 乳腺癌, T-载体, 细胞内重组
摘要:目的利用细胞内重组技术构建大容量人乳腺癌单链抗体(scFv)库.方法收集30例乳腺癌外周转移淋巴结,依次提取总RNA、mRNA,RT-PCR扩增全套可变区基因(VL、VH),各自克隆到T载体,构建T载体库.然后从T载体上酶切VL、VH分步克隆到噬粒载体pDAN5,经电转化TG1得到初级库.辅助性噬菌体感染初级库,使噬菌体抗体表面呈现.提纯噬菌体抗体,滴定浓度后感染大肠杆菌BS1365进行细胞内重组.噬菌体挽救后再次提纯滴定噬菌体,感染大肠杆菌DH5αF',得到次级库,并测序验证.结果 VH、VL T载体库分别为3.5×108和1.7×108,初级库库容量2.5×109.次级库库容量为2.5×1011.结论所采用的引物能够高效扩增目的片段,T载体的应用能够提高抗体基因的克隆效率,细胞内重组将进一步扩大库容量及增加其多样性,这种基于RT-PCR、T载体过渡、细胞内重组的路线能够构建大容量抗体库.