期刊简介

               《现代肿瘤医学》(ISSN1672-4992,CN61-1415/R,月刊)是国家科技部、新闻出版署批准国内外公开发行的国家级肿瘤专业学术期刊,中国抗癌协会系列期刊。本刊系科技部中国科技论文统计源期刊、中国科技核心期刊、《中国学术期刊综合评价数据库》统计源期刊;美国《化学文摘》、《中国科学引文数据库》、《中国期刊网》、《中国学术期刊(光盘版)全文数据库》、《中国核心期刊(遴选)数据库》、《中国生物医学文献数据库》收录期刊;《万方数据-数字化期刊群》全文上网期刊;《CAJ-CD规范》执行优秀期刊。刊物主要介绍当前肿瘤学领域的最新成果及国内外肿瘤诊疗技术的新进展,新动向;刊登肿瘤基础研究,临床诊断、治疗方面的成果以及有创新性,科学性的新方法、新发明、新经验,努力为肿瘤学术交流及学科发展服务。主要栏目有专题专稿、论著、基础研究、临床报道、综述、流行病学、短篇报道、经验交流、中西医结合、护理园地等。                

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  • 杂志名称:现代肿瘤医学杂志
  • 主管单位:陕西省科学技术协会
  • 主办单位:中国抗癌协会 陕西省抗癌协会 陕西省肿瘤防治研究所 陕西省医学会
  • 国际刊号:1672-4992
  • 国内刊号:61-1415/R
  • 出版周期:半月刊
期刊荣誉:中国科技论文统计源期刊期刊收录:国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 知网收录(中), 维普收录(中), 上海图书馆馆藏
现代肿瘤医学杂志2017年第10期

人B7-H3基因的克隆及其重组蛋白在毕赤酵母中的表达和纯化

张喆;代瑛;王希;和婷;董轲;张惠中

关键词:B7-H3, 毕赤酵母, 蛋白表达
摘要:目的:克隆人B7-H3(CD276)基因的完全编码区序列,在毕赤酵母中表达B7-H3重组蛋白并纯化.方法:应用RT-PCR从人肺癌A549细胞中克隆B7-H3基因的完全编码区序列并在3'端加入6×His标签基因,克隆于毕赤酵母表达载体pPIC9K中,构建表达质粒pPIC9K/B7-H3,以该质粒转染酵母菌株GS115,在含有不同浓度遗传霉素(G418)的YPD平板上进行筛选,然后挑取单克隆进行PCR鉴定,甲醇诱导表达鉴定结果为阳性的酵母重组子,表达产物通过离子交换柱纯化后经SDS-PAGE电泳和Western Blot进行检测.结果:应用RT-PCR从人肺癌A549细胞中获得约1 500bp、与目的基因大小相符的条带,且测序正确;构建的酵母表达质粒pPIC9K/B7-H3表达框正确无误;阳性酵母重组子表达产物经6×His标签纯化后,SDS-PAGE电泳显示在70kD处有与预期大小相符的蛋白条带,Western Blot显示该蛋白可分别与抗6×His单克隆抗体及抗人B7-H3抗体呈特异性反应.结论:成功克隆了人B7-H3基因的完全编码区序列,在毕赤酵母中表达并进一步纯化,为B7-H3在肿瘤发生、发展中的作用及机制研究奠定了基础.